2024-03-28
用 HFCF-UF 聯(lián)合 HPLC 法測定血漿中萬古霉素 游離濃度
任菲菲,李相晨,柳熠鑫, 李 珊,張志清
(河北醫(yī)科大學(xué) 第二醫(yī)院 藥學(xué)部,河北 石家莊 050000)
摘要: 目的 建立人血漿中萬古霉素游離濃度的測定方法,并用于臨床治療藥物 監(jiān)測( TDM) 。方法 采用中空纖維離心超濾( HFCF - UF) 分離血漿中的游離萬 古霉素,HPLC 法進(jìn)行濃度測定。色譜柱: Diamonsil C18 柱( 150 mm × 4. 6 mm,5 μm) ; 柱溫: 30 ℃ ; 流動(dòng)相: 甲醇 - 0. 05 mol·L-1 磷酸二氫鉀緩沖液( pH 3. 0) = 17∶ 83( v∶ v) ; 流速: 1. 0 mL·min-1 ; 檢測波長: 236 nm; 進(jìn)樣量: 20 μL; 內(nèi)標(biāo): 去甲 萬古霉素。考察方法的專屬性、線性關(guān)系、精密度、回收率、穩(wěn)定性,并對患者的 血漿樣本進(jìn)行測定。結(jié)果 人血漿中萬古霉素游離濃度在 0. 25 ~ 50 μg·mL-1 呈線性關(guān)系,標(biāo)準(zhǔn)曲線方程 Y = 2. 77 × 10-2??X - 8. 00 × 10-3 ( R2 = 0. 994 9) ; 日內(nèi) 和日間精密度的 RSD 值均小于 10% ,萬古霉素的相對回收率和絕對回收率分別 為 95. 10% ~ 101. 00% 和 88. 41% ~ 101. 20% ,內(nèi)標(biāo)絕對回收率 96. 51% ; 血漿樣 本反復(fù)凍融 3 次或 - 40 ℃下保存 7 d,處理后樣本室溫下放置 6 h、12 h 穩(wěn)定性 良好。20 例患者的萬古霉素游離濃度為 0. 99 ~ 38. 51 μg·mL-1 ,蛋白結(jié)合率為 15. 25% ~ 74. 46% 。結(jié)論 本研究所建立的 HPLC 方法簡便易行、準(zhǔn)確度高,適 用于臨床標(biāo)本中萬古霉素游離濃度的測定。
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關(guān)鍵詞: 萬古霉素; 游離濃度; 中空纖維 - 離心超濾; 高效液相色譜法
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使用產(chǎn)品:Diamonsil C18 5μm 250 x 4.6mm (Cat.#:99903)
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