2012-10-22
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摘要:目的:利用高效液相色譜法測定葉酸-青霉素G酰化酶(PGA)對N-苯乙酰化阿霉素(DOXP)的催化活性,為葉酸導向的酶催化前體藥物的腫瘤治療(FDEPT)研究奠定理論基礎。方法:色譜柱為Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流動相為乙腈-水,用85%磷酸調節pH至2.4;梯度程序:0~3 min為24%乙腈,3~15min為80%乙腈;紫外檢測波長:495 nm;流速:1 mL/min。結果:DOXP和酶解產物阿霉素的tR分別為5.5 min和12.3 min,原酶PGA和葉酸-PGA偶聯酶對DOXP的Km和vmax分別為15μmol/mL,0.094μmol/(min.mg)和19μmol/mL,0.086μmol/(min.mg)。結論:DOXP為PGA的較好底物,葉酸與PGA偶聯對酶的催化活性的影響較小。 |